臭氧作為一種強氧化劑、消毒劑、精化劑、催化劑等被廣泛應(yīng)用于水處理，醫(yī)藥衛(wèi)生，石油化工，食品等多種領(lǐng)域，據(jù)資料記載，已有上百年的歷史。歐美、日本、法國、德國、加拿大等國家自來中應(yīng)用臭氧已達到普及程度，目前國際上在醫(yī)藥方面應(yīng)用更是廣泛，近年來國內(nèi)已逐步應(yīng)用和推廣，特別是用于禽舍消毒防病方面有所突破。本試驗是我們根據(jù)臭氧在禽病防治應(yīng)用的情況進行設(shè)計并實施的。針對我們多年來對禽病發(fā)生的情況，選用了致病性較強的大腸桿菌、葡萄球菌和白色念珠菌進行了殺菌試驗，殺菌效果報告如下：

一、試驗材料

1、儀器高壓蒸汽滅菌器、滅菌錐形瓶(300m L)、滅菌試管(10m L)、滅菌培養(yǎng)皿(9cm)、滅菌移液器接嘴(100m L、1000m L)、微量移液器(10—100m L、100～1000m L)接種環(huán)、酒精燈、超凈工作臺、恒溫數(shù)控培養(yǎng)箱(37℃)、臭氧發(fā)生器：型號，FQ一30 1；額定電壓200／50H z；功率，7w；臭氧量，200～300m g／h、臭氧檢測儀：型號，LIM ICEN OZ ON E M ETE R。

2、試劑營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、血液瓊脂培養(yǎng)基、營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、血液肉湯培養(yǎng)基、滅菌生理鹽水。

3、菌群大腸埃希氏菌，CM CC 44 102—3a8；金黃色葡萄球菌，C M C C 26003—5a10；白色念珠菌，C M C C988001—2a2；菌種由天一科技有限公司提供。

二、試驗方法

1、制備培養(yǎng)基按培養(yǎng)基制作規(guī)定進行。

2、繁殖茼種將大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和白色念珠菌菌種分別接種營養(yǎng)肉湯、血液肉湯培養(yǎng)基37℃24～72h培養(yǎng)復(fù)蘇。用復(fù)蘇菌液接種營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、血液瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)進行菌落形態(tài)觀察，涂片，革蘭氏染色鏡檢，檢查菌種純度。

3、繁殖茵液將純檢的大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和白色念珠菌菌種分別接種營養(yǎng)肉湯、血液肉湯培養(yǎng)基37℃24～72h培養(yǎng)，得到繁殖菌液。

4、殺茵處理見表1，每種菌14個處理，1個對照。

◎、稀釋液配制菌種凍干粉稀釋后接種血瓊脂平板，37℃24h(或72h)培養(yǎng)，平板表面菌落加lm L滅菌生理鹽水，用滅菌接種環(huán)局部混合形成金黃色葡萄球菌懸液。給滅菌三角瓶中加生理鹽水200m L，無菌操作加入上述菌液5環(huán)，混合均勻為稀釋菌液。

◎、臭氧水中殺菌實驗無菌操作，將連接臭氧發(fā)生器的滅菌膠管伸入稀釋菌液底部，打開臭氧發(fā)生器開始殺菌實驗，同時開始計時，當(dāng)達到設(shè)定滅菌時長時，取實驗菌液接種涂布血液瓊脂平板。每時刻接種0．01m L接種液，用接種環(huán)在平板表面涂布均勻，標(biāo)記，37℃24h(72h)培養(yǎng)。試驗開始前先制備菌液空白對照平板接種0.01m L。

◎、臭氧氣體殺菌試驗無菌操作，取稀釋菌液接種血液瓊脂平板，每平板接種量分別為0.01m L、0.02m L，用接種環(huán)在平板表面涂布均勻。將臭氧發(fā)生器的膠管伸人約O．8m的較密閉消毒空間內(nèi)，打開臭氧發(fā)生器，空間內(nèi)充入臭氧5m in后，將試驗菌液接種涂布血液瓊脂平板置入消毒空間，同時開始計時，當(dāng)達到設(shè)定滅菌時長時，取出平板，標(biāo)記。37℃24h(或72h)培養(yǎng)。同時制備菌液空白對照平板2個(0．01m L、0．02m L)。試驗平板經(jīng)37C24h(或72h)培養(yǎng)。在顯微鏡下進行平板菌落計數(shù)。并計算不同臭氧處理的殺菌效果(殺菌率)。http://www.4557315.com